Hur man utför seriell spädningsmetod

En utspädning i kemi är en process som minskar koncentrationen av ett ämne i en lösning. Det definieras "seriell" när proceduren upprepas flera gånger för att snabbt öka utspädningsfaktorn. Detta är en ganska vanlig praxis vid experiment som kräver mycket utspädda lösningar med maximal precision - till exempel dem som behöver utveckla koncentrationskurvor i logaritmisk skala eller tester som bestämmer bakteriedensiteten. Serieutspädningar används ofta i laboratorier inom biokemi, mikrobiologi, apotek och fysik.

Metod 1

Utför en grundläggande utspädning

Välj rätt vätska för utspädning. Detta steg är avgörande - många lösningar kan spädas med destillerat vatten, men inte alltid. Om du spädar en bakteriell eller cellodling måste du använda odlingsmedium. Du måste använda vätskan som valts för alla utspädningar i serien.

Om du är osäker på typen av vätska, fråga om hjälp eller sök online för att se om andra har redan utfört samma typ av procedur.

Förbered flera rör med 9 ml spädningsvätska. Dessa representerar vit utspädning. Du måste tillsätta det koncentrerade provet i det första röret och fortsätt sedan till en serieutspädning i efterföljande.

Det är värt att märka de olika behållarna innan de börjar, för att inte bli förvirrad när proceduren har börjat.

Varje rör innehåller en lösning tio gånger mer utspädd än den föregående, från början som innehåller den rena produkten. Så den första spädningsbehållaren kommer att ha en lösning med en koncentration av 1:10, den andra är 1: 100, den tredje är 1: 1000 och så vidare. Beräkna antalet utspädningar du behöver för att undvika att slänga rör eller vätskor i förväg.

Förbered ett provrör med minst 2 ml koncentrerad lösning. Den minsta kvantitet som krävs för att fortsätta med serieutspädning är 1 ml. Om du bara har 1 ml koncentrerad lösning, kommer du inte ha någon annan. Du kan märka röret som innehåller det med koden SC, dvs koncentrerad lösning.

Blanda försiktigt lösningen innan proceduren påbörjas.

Utför den första spädningen. Överför 1 ml koncentrerad lösning (i röret SC) i provröret märkt med inskriptionen 01:10 och som innehåller 9 ml spädningsvätska. För denna operation använd en pipett och kom ihåg att blanda lösningen försiktigt. Vid denna tidpunkt finns 1 ml lösning koncentrerad i 9 ml vätska, så du kan säga att du har utfört en utspädning med faktor 10.

Utför den andra spädningen. För att föregås med serien måste du aspirera 1 ml utspädd lösning från röret 01:10 och överför den till den andra som visar skrivandet 1: 100 och som innehåller 9 ml vätska. Kom ihåg att blanda lösningen bra före varje överföring. Nu lösningen av röret 01:10 den har späds ytterligare 10 gånger och ligger i röret 1: 100.

Fortsätt med detta förfarande för alla rör som du har förberett. Du kan upprepa det så ofta som nödvändigt tills du får den utspädning du behöver. Om du utför ett experiment som använder koncentrationskurvor kan du använda den här metoden för att skapa en serie lösningar med 1: 1: 10-1: 100-1: 1: 1 spädning.

Metod 2

Beräkna den slutliga utspädningsfaktorn och koncentrationen

Beräkna förhållande slutlig utspädning av en serie. Du kan hitta detta värde genom att multiplicera utspädningsfaktorn för varje rör upp till den sista. Denna beräkning beskrivs med den matematiska ekvationen: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_n var D_t är den totala utspädningsfaktorn e D_n det är utspädningsförhållandet.

Anta att du utför en utspädning 1:10 för 4 gånger. Vid denna tidpunkt behöver du bara ange utspädningsfaktorn i formeln och få: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10 000.
Den slutliga utspädningsfaktorn för det fjärde röret i serien är 1: 10 000. Vid denna tidpunkt är koncentrationen av substansen 10 000 gånger lägre än den för den ursprungliga ospädda lösningen.

Beräkna koncentrationen av lösningen i slutet av serien. För att nå detta värde måste du veta startkoncentrationen. Ekvationen är: C_slutlig = C_initial/ D var C_slutlig är den slutliga koncentrationen av den utspädda lösningen, C_initial är den för utgångslösningen e D är utspädningsförhållandet bestämt tidigare.

Exempel: om din startcelllösning hade en koncentration på 1 000 000 celler per milliliter och ditt utspädningsförhållande är 1 000, vad är den slutliga koncentrationen av det utspädda provet?

Använda ekvationen:

C_slutlig = C_initial/ D ;

C_slutlig = 1.000.000 / 1.000;

C_slutlig = 1000 celler per milliliter.

Verifiera att alla måttenheter sammanfaller. När du utför beräkningarna måste du vara säker på att du alltid har använt samma måttenhet från början till slut. Om de ursprungliga uppgifterna representerar antalet celler per milliliter lösning, måste resultaten också indikera samma kvantiteter. Om initialkoncentrationen uttrycks i delar per miljon (ppm), måste slutkoncentrationen också anges i ppm.

Dela på sociala nätverk:

Relaterade