Hur mäter bakteriell tillväxt

Det finns många metoder för att mäta bakteriell proliferation och vissa är mer komplexa än andra. Även om det är nödvändigt att offra en viss noggrannhet under mätningar är det enklaste sättet ganska noggrant och används vanligen. De mest kända teknikerna är observationen och antalet bakterier, måttet på våt och torr massa eller graden av grumlighet. Skolelaboratoriet ska ha all utrustning och material som krävs för att utföra minst ett av dessa experiment.

steg

Metod 1

2

Använd trowelplattan eller för det solidifierbara substratet. Du kan också sätta bakterierna direkt i behållaren för att observera dem under ett mikroskop, använd bara dem på plattan - notera antalet celler som finns närvarande.

3

Se till att provet har rätt koncentration. Om det finns för många bakterier överlappar de och du kanske inte kan räkna dem korrekt - i det fallet bör du späda ut kulturen med mer lager. Om koncentrationen är för låg, har du inte tillräckligt med mikroorganismer för en korrekt uppskattning, då måste du filtrera buljongen med respekt för lämplig teknik.

4

Räkna bakterierna. Det sista steget är det fysiska räkningen. Observera provet genom räknarkammarens mikroskoplins och skriv antalet celler du ser - jämför resultatet med de andra testen.

Metod 2

2

Se till att kulturen finns i en Erlenmeyer-kolv. Annars häll det i detta kärl - i detta skede borde det fortfarande vara en buljong, även om du separerar senare.

3

Torka en aluminiumvågspanna inuti laboratoriekaminen. Alternativt kan du använda ett acetatcellulosafiltermembran med en diameter av 47 mm och med 0,45 um porer. Oavsett stöd du bestämmer dig för att använda, väger det så att du vet vilken massa du måste subtrahera senare, när bakteriecellerna är ordnade.

4

Blanda innehållet i kolven där du har hällt kulturen för att blanda den. Cellerna tenderar att sätta sig på botten på grund av gravitationen - blanda sedan noggrant med att fördela dem i suspension i vätskan och göra provet mer enhetligt.

5

Använd en centrifug för att separera bakterierna från förrådet. Detta verktyg roterar snabbt kolven och en motvikt genom att avlägsna vätskan och lämna kulturen. Läs den här artikeln för mer information.

6

Skrapa den bakteriella återstoden och överför den till väggen. Släng av lageret eftersom du inte behöver det längre, men håll kolven för att du fortfarande behöver den.

7

Skölj centrifugen och häll det vatten du använder i disken. Lägg en kolv sköljvatten i bakteriecellerna för att väga den våta massan.

8

Hitta den torra massan. Placera väggen i laboratorievärmaren och låt bakterierna torka vid 100 ° C under 6-24 timmar, med hänsyn till instruktionerna för det specifika instrumentet du använder och på väggen - se till att temperaturen inte är för hög för att undvika bränna celler. När lämplig tid har passerat väger materialet som påminner dig om att subtraherar matens massa.

Metod 3

2

Ljus upp provet. I enkla termer är grumligheten nivån av opacitet av en vätska - du borde få ett värde som mäts i NTU (nekhelometriska turbiditetsenheter). Du kan behöva kalibrera utrustningen innan du kan fortsätta med en nefelometri exakt.

3

Ta några anteckningar. Turbiditet motsvarar mängden bakterier i provet. Spektrofotometern indikerar procenten av överföringen (% T) av ljuset - ju högre talet är, desto starkare är provet (mindre bakterier). Jämför olika mätningar av bakteriell tillväxt som erhållits med olika metoder.