Hur man gör en konstgjord kultur av en tyg

En artificiell vävnadskultur är en metod för att erhålla ett större antal vävnadsceller, vilket gör att de utvecklas utanför kroppen. Det är nödvändigt att förbereda en konstgjord miljö där cellerna kan leva och växa - en gång odlad kan de användas för flera olika typer av studier, inklusive sådana för vävnadsbiokemi och läkemedelsutveckling.

Del 1

Förbereda kulturen

Välj vilken typ av tyg du vill utveckla i laboratoriet. Du kan använda både djur- och växtceller - vissa människor gör en vävnadsodling som har tagits direkt från en växt eller ett djur. I andra fall görs celler för att utvecklas från andra konserverade cellinjer som kommer från en tidigare kultur.

Nya kulturer kan utvecklas från extraktion av en vävnad från en organism, och i detta fall kallas de "primär". Cellerna delar bara ett tag innan de uppträder senescens.
En kontinuerlig celllinje manipuleras med kemikalier eller virus som gör det möjligt att multiplicera i obestämd tid (Immortalisering).

Förbered kulturmiljön. Villkoren måste vara olika beroende på celltyp, men i allmänhet behöver du:

En kontrollerad temperatur. Det ideala intervallet förändras beroende på vilken typ av celler du växer, men i genomsnitt måste den ligga mellan 20 och 45 ° C.

En kontrollerad pH-nivå brukar inte vara mindre än 6,0 och inte mer än 7,5.

Ett kontrollerat osmotiskt tryck.

En riktig utbyte mellan syre och koldioxid.

Hormoner.

Tillväxtfaktorer.

Ett substrat som ger cellerna de näringsämnen de behöver, vilket inkluderar aminosyror, kolhydrater, vitaminer och mineraler.

Ljuset. Detta är ett grundläggande element om du växer växtceller som utför fotosyntes.

Bestäm vilket kulturmedium du ska använda. Vissa celler växer bättre när de är fästa på ett substrat. Bland de möjliga finns det:

Fast substrat, även kallat vidhäftande. Vävnader som tas från organ som njurarna är vanligtvis vidhäftande, eftersom de är fästa vid bindväv.

Halv-fast eller monoskikt substrat. Denna typ av kultur bildar vanligtvis ett enda skikt, ofta lika mycket som en cell, på behållarens botten.

Suspended culture. Celler är inte förankrade i ett substrat, men växer växlande i odlingsmediet. Blodceller odlas ofta på detta sätt.

Del 2

Utför kulturen

Respektera tillverkarens protokoll om kulturs initiala fas. Det finns flera företag som tillhandahåller laboratorier de material och verktyg som behövs för denna typ av studie. När du köper allt du behöver, hittar du det protokoll som du behöver följa i förpackningen. Det är en serie instruktioner som beskriver exakt hur man överför det prov du vill växa i tillväxtmediet. Bland de mest kända leverantörerna är följande:

Brand;
Fisher Scientific;
Thermo Scientific.

Foder cellerna du växer om du arbetar med däggdjur. Generellt är det nödvändigt att leverera odlingsmediet varje 2-3 dagar - det respekterar leverantörens protokoll angående näring av cellerna.

Förfarandet bör inte ta mer än 20 minuter.

Om du inte ger tillräckligt med näringsämnen kommer cellerna att dö.

Separera grödan om behållaren börjar bli för trång. För att cellerna ska fortsätta utvecklas måste du överföra några av dem till nya petriskålar med lägre densitet. På detta sätt fortsätter både den ursprungliga och den nya grödan att multiplicera.

Du kan också frysa några grödor för framtida arbete eller upprepa experimenten om du har några föroreningsproblem. Följ de angivna protokollen, för att känna till temperaturen för cryopreservering (eller frysning) av cellerna.

Dela på sociala nätverk:

Relaterade

Hur man gör en konstgjord kultur av en tyg

steg

Del 1

Del 2